解決方案丨水中抗生素的測(cè)定

近年來，環(huán)境水污染問題日益突出，水中藥品及個(gè)人護(hù)理用品（PPCPs）這類新型污染物也備受關(guān)注。抗生素藥物作為其中一類，常伴隨動(dòng)物的排泄物、屠宰血水等進(jìn)入地球水循環(huán)體系，破壞水體生態(tài)。因此開發(fā)水中抗生素的檢測(cè)方法，對(duì)提升自然水體和廢水中抗生素的監(jiān)測(cè)能力具有重要意義。

在水環(huán)境中，抗生素的含量一般都較低，直接進(jìn)分析儀器檢測(cè)較難達(dá)到儀器的檢出限。固相萃取作為一種富集凈化的技術(shù)，能夠很好將檢出限降低，利于后端分析儀器的檢測(cè)。本文采用睿科Fotector Plus高通量全自動(dòng)固相萃取儀實(shí)現(xiàn)對(duì)水樣中24種抗生素（磺胺類7個(gè)、喹諾酮類5個(gè)、β-內(nèi)酰胺類1個(gè)、大環(huán)內(nèi)酯類3個(gè)、四環(huán)素類4個(gè)、氯霉素類3個(gè)、林可霉素類1個(gè)）的富集與洗脫，洗脫液經(jīng)睿科Auto EVA 80全自動(dòng)平行濃縮儀吹干，30%甲醇水溶液復(fù)溶，高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測(cè)，內(nèi)標(biāo)法定量。在20ng/L的加標(biāo)水平下，24種抗生素的平均回收率在50%-130%之間，RSD值小于10%。說明本方法可以較好地滿足水中24種抗生素的檢測(cè)。

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儀器與耗材

1.1儀器

Fotector Plus高通量全自動(dòng)固相萃取儀

Auto EVA 80全自動(dòng)平行濃縮儀

Agilent 1290+6470高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀

全自動(dòng)固相萃取儀

全自動(dòng)平行濃縮儀

1.2耗材

HLB固相萃取柱 (RayCure，500mg/6mL，貨號(hào)：RC-204-36477）

1.3試劑

甲醇（優(yōu)級(jí)純）

濃氨水（分析純）

濃鹽酸（分析純）

乙二胺四乙酸二鈉（分析純）

超純水

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樣品制備

水樣先用0.45μm濾膜過濾，準(zhǔn)確量取500mL，加入1g Na2EDTA超聲溶解，用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH=4，待萃取。

2.1富集和濃縮

依次用10mL甲醇和10mL超純水對(duì)固相萃取柱進(jìn)行活化，將水樣以5mL/min的速度進(jìn)行上樣，之后用10mL超純水淋洗柱子，除去雜質(zhì)及Na2EDTA。用氮?dú)鈱⑿≈蹈桑?mL甲醇和5mL 5%氨水甲醇洗脫目標(biāo)化合物(具體步驟請(qǐng)見圖-1)。將洗脫液用Auto EVA 80全自動(dòng)平行濃縮儀于40℃條件下濃縮至干，加入內(nèi)標(biāo)物磺胺甲惡唑-d4、諾氟沙星-d5、羅紅霉素-d7和地美環(huán)素30%甲醇水溶液定容至1mL，渦旋混勻，過濾膜上機(jī)檢測(cè)。

2.2固相萃取條件

圖-1 Fotector Plus固相萃取方法

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結(jié)果與討論

為了驗(yàn)證該方法的準(zhǔn)確度和精密度，本實(shí)驗(yàn)向純水樣品(500mL)加入24種抗生素混標(biāo)進(jìn)行加標(biāo)回收驗(yàn)證(n=4)，加標(biāo)水平為20ng/L，數(shù)據(jù)如表-1所示。除四環(huán)素類抗生素的回收率小于60%之外，其余抗生素的加標(biāo)回收率均在60%-130%之間，RSD值控制在10%以內(nèi)。說明該方法能夠較好地用于水中24種抗生素的檢測(cè)。

表-1.純水樣品的加標(biāo)回收率及RSD值（n=4）

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總結(jié)

本方法使用睿科Fotector Plus高通量全自動(dòng)固相萃取儀可實(shí)現(xiàn)凈化過程的自動(dòng)化，從活化到上樣、洗脫一步到位；最多一天能夠處理180個(gè)樣品，高效便捷地完成固相萃取過程。同時(shí)搭配睿科Auto EVA 80高通量全自動(dòng)平行濃縮儀進(jìn)行濃縮，二者的樣品架可兼容使用，無需進(jìn)行樣品轉(zhuǎn)移，操作連貫簡(jiǎn)便，避免樣品的損失。